Almacenamiento, manipulación y procesamiento de micrografías de electrones

Algunos de los desafíos a los que se enfrenta un microscopista de electrones son: la preparación de ejemplares, la evaluación microscópica y la técnica fotográfica. No obstante, es la imagen fotográfica final del ejemplar la que le permite evaluar y comunicar los resultados. Si sigue unas directrices básicas de almacenamiento, manipulación y procesamiento de productos de micrografías de electrones, podrá conseguir la calidad, consistencia y repetibilidad necesarias en las micrografías de electrones:  

• Almacenamiento de películas EM 
• Manipulación y uso de luces de seguridad en cuarto oscuro 
• Evitar marcas estáticas 
• Procesamiento de películas EM 

Almacenamiento de películas de micrografías de electrones

Las películas de micrografías de electrones (EM) son produtos fotográficos y, debido a sus propiedades especiales, pueden cambiar con el tiempo. Estos cambios pueden verse acelerados con las altas temperaturas, la humedad relativa alta y la interacción química con materiales que no son fotográficamente inertes (como, por ejemplo, determinados plásticos, disolventes, pinturas y gases).
Si se almacenan películas durante demasiado tiempo o en condiciones adversas, se podría producir una pérdida de velocidad, un aumento de velo, un cambio de contraste o una combinación de todos estos efectos. Si sigue las sencillas reglas que se indican a continuación, podrá prolongar la vida de sus películas EM.
Películas sin exponer
Como regla general, evite las temperaturas altas así como la humedad alta. Las películas de micrografías de electrones se pueden almacenar a temperatura ambiente si no supera los 70 °F (21 °C) en su paquete original a prueba de humedad, con una humedad relativa del 50%.
Tiempo de calentamiento después de la extracción del almacenamiento en frío
Para evitar la condensación de humedad en las superficies frías de la película, deje que se calienten las películas a la temperatura ambiente antes de abrir el embalaje hermético a los gases que se esté utilizando. Los tiempos de calentamiento se basan en la separación decartones después de la extracción del almacenamiento en frío para conseguir una mejor circulación de aire. El tiempo de calentamiento es de dos horas (al extraer de nevera) o tres horas (al extraer de congelador).
Películas expuestas
Procese las películas lo antes posible después de la exposición para evitar el deterioro de la imagen latente. Puede almacenar las películas EM expuestas durante 72 horas si la temperatura es inferior a 75 °F (24 °C) y la humedad relativa es del 50% o más baja. Si va a almacenar películas durante un largo periodo de tiempo, protéjalas de la humedad guardándolas en una lata o recipiente hermético y colóquelas en la nevera. No deje las películas expuestas en las platinas más tiempo del necesario.
Películas procesadas
Para guardar las películas EM durante largos periodos de tiempo, debe prestar especial atención a los procedimientos de procesamiento. Consulte la sección referida al "procesamiento para conseguir la estabilidad de la imagen" de esta publicación y siga paso a paso las instrucciones de procesamiento. Las impresiones y los negativos EM se pueden almacenar a temperaturas normales de unos 70 °F (21 °C) o inferiores. Se deben guardar en un lugar seco donde la humedad relativa esté entre el 30% y 50%; una humedad relativa por debajo del 30% provoca una fragilidad excesiva, mientras que la humedad por encima del 60% desarrolla el crecimiento de moho y hongos. Es preferible mantener una temperatura y humedad constantes. Si la temperatura es algo superior de forma temporal, es posible que no se produzca ningún daño si la humedad relativa es inferior al 40%. Las temperaturas por encima de los 75 °F (24 °C), combinados con una humedad relativa por encima del 60%, provocan un crecimiento acelerado de moho u hongos, el deterioro de la imagen y que se peguen o glaseen las superficies del negativo.
Proteja sus negativos e impresiones de determinados compuestos de azufre (como el sulfuro de hidrógeno y el gas de carbón) y de humos de óxidos de nitrógeno, peróxidos, formaldehído, ozono y otros gases oxidantes dañinos. Mientras que las pinturas de látex no presentan ningún problema, los humos de las pinturas con base de petróleo pueden provocar una decoloración grave; no coloque los negativos en una zona de pintura fresca con pinturas con base de petróleo durante al menos cuatro semanas.

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Manipulación y uso de luces de seguridad en cuarto oscuro

Dado que la emulsión y los laterales de la base de las películas se puede arañar si se manipulan con poco cuidado, y como las superficies también pueden quedar marcadas al entrar en contacto con dedos húmedos, se deben tener en cuenta varias precauciones a la hora de manipular productos fotográficos EM en el cuarto oscuro. Las siguientes directrices sobre la manipulación en cuarto oscuro le ayudarán a evitar la mayoría de los problemas más comunes.

1. Compruebe que no hay fugas de luz en la sala de procesamiento ni en la carga de películas. Para ello, apague todas las luces y quédese en el cuarto oscuro durante 10 minutos. Durante este tiempo, sus ojos se acostumbrarán a la oscuridad y entonces podrá ver si entra algo de luz en la sala por las rendijas de la puerta, por los conductos de ventilación y calefacción o por otras zonas.
2. Antes de apagar las luces para cargar o procesar películas, asegúrese de que todo lo que necesita esté al alcance de su mano. Si almacena las películas expuestas en sus cajas originales, asegúrese de etiquetarlas de forma clara. Separe las cajas de los negativos expuestos de las cajas de películas sin exponer para evitar exponer el mismo material dos veces.
3. Utilice solamente las condiciones de luz de seguridad recomendadas, tal y como se indica en la hoja de instrucciones que se incluye con las películas. Para obtener más información, consulte la sección de luces de seguridad que se muestra a continuación.
4. Manipule las películas por los bordes para evitar que se arañen o abrasen..
5. Asegúrese de que sus manos estén limpias y completamente secas a la hora de manipular películas.
6. Retire cualquier partícula de polvo, fibra de papel o plástico que se pueda haber depositado en la película durante el envío. Si estas partículas no se retiran antes de la exposición, podrían aparecer haces luminosos de polvo no deseados (puntos transparentes) en el negativo y contaminar así la columna del microscopio. Para retirar estas partículas, limpie la superficie de emulsión con un cepillo de pelo de camello limpio. También se puede inyectar aire, nitrógeno o gas comprimido para retirar las partículas de la superficie. Si utiliza gas comprimido, asegúrese de que esté limpio, seco, que no contenga petróleo y que la presión de aire no supere las 20 psi (1,4 kg/cm2) ya que una presión excesiva puede dañar la superficie de emulsión.
7. Retire las películas del embalaje y cárguelas en un soporte adecuado antes de secarlas. No seque la película del paquete abierto, que contiene una cartulina de protección, ya que el tiempo de bombeo se extenderá demasiado y la humedad de las cartulinas contaminará con rapidez el petróleo de la bomba mecánica.
8. Evite la exposición extrema en los bordes de la película. Los bordes exteriores de 0,25 pulgadas (0,65 cm) pueden verse afectados a la hora de manipularlos o procesarlos.

Utilización de las luces de seguridad
Las películas de micrografías de electrones deben manipularse y procesarse cumpliendo las condiciones de luz de seguridad adecuadas. Carestream Molecular Imaging recomienda una lámpara de luz de seguridad equipada con un Filtro de Seguridad bombilla GBX-2 y 15 W esmerilado para una máxima protección y mayor visibilidad cuarto oscuro. La luz de seguridad se debe colocar de forma que siempre esté a 4 pies (1,2 metros) o más con respecto a la película.

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Evitar marcas estáticas 

Cuando las películas estén expuestas al rozamiento, es posible que se carguen positiva o negativamente con electricidad estática, especialmente cuando la humedad relativa es baja. La película trata de volver a su estado neutral transfiriendo los electrones a otros objetos o desde otros objetos. A veces, esta transferencia se produce lentamente sin que se produzca ningún efecto adverso; sin embargo, otras veces la carga se crea de forma más rápida de lo que tarda en disiparse. En estas ocasiones, una descarga repentina produce calor, luz y radiación ultravioleta. La radiación ultravioleta forma una imagen latente en la película con la forma de una descarga estática, lo que produce imágenes no deseadas en los negativos procesados.
Las marcas de bifurcaciones que observa a veces en los negativos son provocados por la descarga estática. Son propios de la carga negativa que se descarga en un pequeño punto u objeto. No obstante, las marcas estáticas pueden adoptar otras formas que no se reconocen con tanta facilidad. Por ejemplo, los puntos difusos con centros oscuros se producen cuando una carga crea una platina en la película y, a continuación, se descarga en la película.
Durante la fabricación y embalaje, Carestream adopta todas las medidas posibles para evitar que se creen cargas estáticas en productos sensibilizados. Las siguientes precauciones le ayudarán a evitar los problemas provocados por la electricidad estática:

• Evite manipular las películas con movimientos bruscos que pueden provocar el rozamiento.
• Si es posible, mantenga la humedad relativa entre el 40% y 60% en las zonas donde carga y descarga películas.
• Mueva las piezas de la platina con lentitud y retire los componentes de igual modo a la hora de cargar y descargar películas.